薄层色谱仪的操作和应用(薄层色谱仪使用方法)

admin 24 2022-04-30 16:09:16

一、薄层色谱操作

⑴制板(以硅胶板为例)

选择合适的玻璃板(经常使用显微镜上的载玻片),依次用水和乙醇洗净,晾干。取适量薄层色谱用的硅胶,加适量蒸馏水调成糊。调制时慢慢搅拌,勿使产生气泡。将糊倒在玻璃板上,摇动摊平,晾干。使用前放入烘箱内,在105-115oC左右烘干40-50分钟。冷却后使用。

⑵点样

将试样用最少量展开剂溶解,用毛细管蘸取试样溶液,在薄层板上点样。在样点上轻轻画出一条平行于玻璃板底边的细线。薄层色谱板载样量有限,勿使点样量过多。

⑶展开

吹干样点,竖直放入盛有展开剂的有盖展开瓶中。展开剂要接触到吸附剂下沿,但切勿接触到样点。盖上盖子,展开。待展开剂上行到一定高度(由试验确定适当的展开高度),取出薄层板,再画出展开剂的前沿线。

⑷显色,计算Rf值

挥发干展开剂,选择合适的显色方法显色。量出展开剂和各组分的移动距离,计算各组分的相对移动值。

二、薄层色谱应用

⑴可用于判断两个化合物是否相同(同一展开条件下是否有相同的移动值);

⑵可用于确定混合物中含有的组分数;

⑶可用于为柱色谱选择合适的展开剂,监视柱色谱分离状况和效果;

⑷可用于检测反应过程。

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