几种瓷珠菌种保存法了解下(磁珠保存菌种原理)

admin 22 2022-05-08 18:19:19

传统的菌种保存方式简介斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可广泛用于细菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。液体石蜡保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放线菌及需氧菌,方法简便,可防止斜面干燥和氧气进入,但一些固氮菌、分枝杆菌、毛霉、厌氧菌等不适宜用此法。甘油冷冻保存法:用于一般细菌的保存,需使甘油终浓度为20%左右,然后-20℃或-70℃以下保存。融化时需要水浴溶化。真空冷冻保存法:具有低温、干燥、无氧的保存条件,适用于98%以上菌种的保存,但操作复杂,一般实验室难以使用。液氮保存法:基本所有微生物均可保存,并且保存时间长,但操作较为复杂而且需要设备,不适用于一般实验室保存菌种。沙土保存法半固体保存法瓷珠菌种保存法的原理瓷珠菌种保存管是实验室保存菌种的容器,管内有表面凹孔小瓷珠用于细菌的吸附和保存,放置于-20℃或-80℃下便可创造干燥、低温、缺营养的环境,使菌株处于“休眠” 状态,方可长期保存(视不同菌种与保存温度,一般可保存3-10 年), 同时菌种保存管的取用和保存较为便利(取用复苏及保存菌种仅需1分钟)。瓷珠菌种保存管的优点用途:菌种保存、复苏和运输。优点:操作简单方便、菌种保存快速、包装物体积小、菌种保存时间长。操作简单方便:挑取细菌新鲜纯培养物,接入菌种保存管。菌种保存快速:混匀后,吸出冷冻保存液。包装物体积小:1.8ml冷冻管。菌种保存时间长:2-8℃可保存6个月;-20℃可保存12个月;-80℃可保存24个月。瓷珠菌种保存管的使用方法1.从培养18h以上的平板上刮去新鲜纯培养物于菌种保存管中,配成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液。2.拧紧保存管,来回颠倒几次使细菌乳化,不能旋摇。3.用无菌移液器将菌种保存管内的液体吸取干净,妥善放置被吸出的液体。4.拧紧保存管,迅速将其置于-20℃或-70℃冰箱中。使用时的注意事项被保存的菌种要求是经过纯化后培养 18-24h 内的新鲜菌种(细菌18-24h,酵母菌需3 天,形成孢子的微生物保存孢子,而放线菌和丝状真菌需培养7 天后保存),不宜使用老化或未经鉴定的菌种。菌种保存浓度必须要做3-4 麦氏比浊度,如接种浓度过低将会降低复苏效果。待保存于菌种保存管中的菌种完全乳化均匀吸附在多孔小瓷珠后,要将多余的菌种保存液吸取出来并弃之,否则在复苏时的冻融过程中会损伤菌株活性。做厌氧菌保存时,应提供厌氧的环境,如厌氧箱、厌氧袋,菌种保存管中可通入氮气来驱除保存菌种时所引入的氧气。菌种复苏时,也要创造厌氧的环境。菌种复苏完成后,对使用菌株需要进行再次纯化,以保证菌株的单一性。

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