HSF95 Insect Cell Medium昆虫细胞培养基(hsf950)

admin 27 2022-05-01 14:17:37

产品描述 CW003培养基适用于sf9、High Five等昆虫细胞悬浮培养和瞬时表达,含有细胞生长的全 部营养成分,无需添加物即可使用。 产品特点  产品不含血清  即用型完全培养基,无需添加额外成分  支持sf9、High Five等昆虫细胞的悬浮培养驯化与高密度培养  支持杆状病毒载体表达系统生产重组基因蛋白 基础参数外观 澄清透明淡黄色或黄色液体 渗透压 375-420 mOsm/kg pH 6.0-6.4 无菌检测 无菌 内毒素 <5 EU/mL 储存条件 2-8℃,避光 效期 12个月 产品用途 仅用于科学研究,不适用于人类或动物的诊断和治疗 产品使用方法 细胞驯化与传代 1) 培养条件 温度:27oC;推荐摇床转速:110-130 rpm;传代细胞密度控制在0.8-1.2×106 cells/mL。 2) 直接驯化 大部分情况下,培养于其他培养基中的sf9、High Five细胞,可以直接适应至CW003培养 基,只要按照日常传代方式(稀释)更换培养基即可。 3) 渐进式驯化 注意:选用低代次、处于对数生长期的细胞进行驯化。 ①在原培养基中复苏细胞并继续使用该培养基传代2到3次至细胞生长稳定,使用原培养基 +CW003培养基(CW003比例从25%至90%)逐渐驯化,传代细胞密度控制在0.8-1.1×106 cells/mL,每48h进行传代。②待细胞在含90%以上CW003培养基生长正常后,可尝试将细胞传代至完全 CW003培养基 中,并连续传代3-4次,如细胞保持稳定生长,即已适应至CW003培养基。 细胞复苏 1) 迅速取出冻存的细胞,在37℃水浴条件下进行快速解冻(可以在水中轻轻晃动,时间控制 在120s以内),至冻存管内剩余小块冰晶。 2) 在生物安全柜中,将融化的细胞全部转移至无菌离心管中,加入10 mL预热至37℃的培养 基,离心换液(175 g,5 min)去除全部上清,加入20-30mL预热至37℃新鲜培养基重悬,后 转移至摇瓶培养。 细胞冻存 1) 冻存细胞时,要选择处于对数生长期、状态良好,活力≥98%的的细胞; 2) 事先计算好冻存的细胞管数和所用的培养基的体积,冻存密度为2.5-3.5×107 (通常冻存 浓度为1.0-2.0×107)cells/ml/支; 3) 细胞冻存液配制: 45%新鲜培养基+45%原培养基(上清)+10%DMSO,充分混匀,存放于4℃,一般为当 天用当天制备; 4) 以175 g,5 min的条件离心收集细胞,弃上清,用冻存培养基( 4℃ )重悬细胞; 5) 将重悬的细胞液迅速分装细胞到无菌的冻存管中,每支1ml,并贴好标签; 6) 将细胞冻存管放到程序降温冻存盒(注意填充异丙醇,4℃预冷)中,置于-80℃ 冰箱(每 分钟下降1℃),过夜存放后将细胞转入液氮罐中进行保存。

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