冷冻管应如何解冻？

取出冷冻管后，须立即放入37 C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。

细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？

除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分贴壁细胞株，在解冻之后，应直接放入含有12-16ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，悬浮细胞可先离心去掉DMSO，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。

可否使用不一样的培养基培养同一个细胞呢？

不能。每一个细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活或者老化空泡现象，如一定要替换，建议驯化，按照血清的驯化方式操作即可。

可否使用不同品牌的血清进行细胞培养呢？

需要按比例驯化，新旧血清比为：3：2，1：2，1：3直到完全更替。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

培养细胞时应使用5 %或10% CO2？或根本没有影响？

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7 g时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5 g时，则应使用5% CO2培养细胞。

何时需更换培养基？

视细胞生长密度而定，整体50%以下2-3天更换一次培养基，整体密度50%以上一天更换一次或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。

附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA浓度？应如何处理?

一般使用之trypsin-EDTA浓度为0.05% trypsin-0.53m MEDTA.4 Na。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于–20 C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。

悬浮性细胞应如何传代处理？

一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部分含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。

贴壁细胞如何传代处理？

依照细胞株基本数据和细胞的生长情况传代，若第一次接种不了解细胞的基本特征，建议1：2传代，后续观察细胞特点，若1-2天即可达到密度80%以上建议1：3或以上。传代的时候请注意：细胞数太少或稀释得太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。

欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？

欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5 - 10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡。

细胞培养注意以上操作，有事半功倍的效果哦

以上就是本期的内容，更多资讯，欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯。

安培生物科技有限公司介绍：

安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供独特细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、独特的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。